大鼠脑缺血再灌注损伤模型步骤

大鼠脑缺血再灌注损伤模型

模型：

麻醉大鼠，然后在颈部中线切开一个切口，暴露颈外动脉和颈内动脉，用无菌缝合线结扎，血管夹夹住颈内动脉。随后在颈总动脉上切口，然后插入线栓。2 h后，大鼠进行再灌注。模型大鼠成功构建的标准：大鼠出现症状如偏瘫，对侧前肢下垂和站立不稳。Bederson评分在1-3分，48小时内没有死亡，就认为模型成功。文献上用的是2-3分的模型。

优点：

无需开颅，创伤较??；缺血部位相对固定，可控性好；可实现脑缺血后再灌注，是理想的标准局灶性脑缺血动物模型。

动物选择：

目前多选用SD大鼠?？悸谴笫蟠萍に厮蕉阅匀毖鹕丝赡艿纳窬；せ萍凹に厮降纳硇圆ǘ源笫笄樾鞯挠跋?，采用血管解剖结构更为清晰的雄性SD大鼠作为MCAO的动物模型。

体重和鼠龄：

大鼠大脑中动脉的长度和粗细与其体重形成正比，目前多主张大鼠体重控制在250～300 g。我们在实验中采用240～270 g大鼠。

术后再灌：

选择缺血后2h再灌注，在大鼠体外伤口缝合处找到线头，轻轻拔出线栓 2～3 cm 剪断，若此时大鼠已*清醒，可注射少量麻醉后再将线栓拔出，以防拔线栓时大鼠过度挣扎加大损伤。

术后护理与并发症：

术后将大鼠放回鼠笼、保温，期间可将大鼠头部微微垫高，以防侧枝循环过快恢复。

MCAO模型评价方法：

神经功能评分、TTC 染色、脑组织含水量、局部脑血流测定和头颅磁共振等。

神经功能评分：Bederson 评分

   0分：无神经损伤症状

   1分：悬尾实验不能*伸展对侧前爪

   2分：前肢抵抗对侧推力能力下降

   3分：向对侧转圈

注意事项：

00001. 线栓插入深度为从颈总动脉分叉处插入约 18 mm，即将线栓送入颈内动脉后，黑色标记点过分叉点约 1 mm，感觉稍有阻力时即停止插入。

00002. 线栓插入位置和走向：颈总动脉插入。结扎颈总动脉近心端，远心端挂线备用，结扎颈外动脉，颈内动脉系活结或动脉夹夹住。