吉姆萨染色实验

吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好，结构显示更清晰，而胞质和中性颗粒则着色较差。

基本方案

实验材料 

原位杂交玻片

试剂、试剂盒

吉姆萨染色液磷酸钠缓冲液乙醇二甲苯

仪器、耗材

染色盘培养箱滤纸

实验步骤

1.  将显影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盘中。

（1）1个盘：pH6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液，所配的25倍稀释的吉姆萨染液。

（2）3个盘：水。

（3）脱水系列溶液：

①3个盘：分别盛50%、70%和95%乙醇。

②2个盘：盛有100%乙醇。

③3个盘：盛有二甲苯。

3.  在25倍稀释的吉姆萨染液中染玻片20 s（依染色时间决定染色的强弱），将玻片在水中浸泡3次，每次2 min。

4.  连续用乙醇脱水系列溶液处理，每盘中浸泡2 min，将玻片移至二甲苯盘中，毎次浸泡2 min，共3次。

5.  在通风橱中，按如下操作压片固定：用一平头镊（拿在左手），从二甲苯中取出一块玻片，夹住磨面端置水平。加4滴Permount 的于另一端（切片所处位置），左手拿一干净的盖玻片，很缓慢地放在载玻片上（在加压片固定介质和盖玻片前，勿使玻片变干，因微小气泡会造成人为假象）。

6.  用3MM 滤纸，沿盖玻片边缘，小心吸去多余固片介质/二甲苯，并擦拭载玻片背面（勿擦拭盖玻片）。

7.  将玻片平放于一硬纸盒盘上，置42℃温孵箱2天使之凝固。

8.  以剃须刀片小心刮去载玻片背面残留胶乳，染料及固片介质。用镜头纸或普通棉纸擦去尘埃。放入玻片盒，必要时，载玻片上再注明标签。

9.  显微镜观察玻片，观察时可依信号强弱，调节光亮。

注意事项

1.  勿将玻片直立存放于玻片中，因此时固片介质尚未凝结。

来源：丁香通