慢性阻塞性肺病(COPD)小鼠模型的建模方法

实验周期：4-6 weeks

建模方法：

主要试剂： 红金龙香烟（湖北中烟工业有限责任公司生产，烤烟型，每支含焦油量9mg、烟气烟碱量0.7mg、烟气一氧化碳量12mg），脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，美国Sigma公司），TNF-alpha和IL-18 ELISA试剂盒cloud-clone公司）。
建模方式：SPF小鼠，适应性饲养1周，采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠动物模型分别于第1、29经鼻腔滴入LPS（30μg/6μL），第2-30天（除第29天）采取熏香烟法，将小鼠放入自制的玻璃熏箱，10支/次，30min/次，5d/周，共4周。

模型评价
一般观察：一般情况空白对照组小鼠无死亡，毛发光泽，呼吸均匀，活动正常；模型对照组小鼠毛发无光泽，部分有脱毛现象，躁动，熏烟时喜扎堆，倦怠蜷缩，汗出，腹部胀大，呼吸急促，出现点头运动，甚者张口呼吸明显。

小鼠肺功能检测看小鼠气道阻力、动态肺顺应性、最大呼气流量、吸气时间、呼气时间、

组织病理学
肺组织形态学检测：
腹腔麻醉小鼠后，开胸暴露胸腔：取左侧肺叶固定于10%甲醛溶液24h，常规脱水石蜡包埋，切片行HE染色，光镜下观察。
空白对照组小鼠肺泡结构清晰，肺泡大小均匀，气道黏膜上皮结构完整，纤毛排列整齐；模型对照组小鼠部分肺泡壁塌陷，肺泡不规则扩大并相互融合，形成肺大泡，肺间质内可见不同程度的炎性细胞浸润，支气管黏膜上皮脱落，黏膜皱襞增多，突入管腔，纤毛黏缩，管腔变窄，符合COPD病理改变。

标志因子水平
TNF alpha、Il-18检测：
最后一次烟熏完后24小时内处死，按0.05mL/10g）腹腔麻醉小鼠，将小鼠腹主动脉取血法取血1mL，室温下放置2h后，2 000r/min离心20min，取血清，-20℃保存备用。按ELISA试剂盒操作步骤说明检测小鼠血清中TNFalpha、