人肝癌原位小鼠动物模型实验

人肝癌原位小鼠动物模型实验

构建人肝癌原位小鼠动物模型是为了模拟人类肝癌的生长和发展，以便于研究肝癌的发病机制、药物筛选和治疗策略的评估。

以下是人肝癌原位小鼠动物模型实验的一般步骤：

  1.选择合适的小鼠品系：通常选择免疫缺陷的小鼠品系，如裸鼠（nude mice）或NOD/SCID小鼠，以减少对人肝癌细胞的免疫排斥。

  2.准备肝癌细胞：选择合适的人肝癌细胞系，如HepG2、Huh-7等，并在体外培养至适宜的密度和传代。

  3.细胞接种：将肝癌细胞悬液直接注入小鼠的肝脏内，通常通过腹腔注射或切开肝脏进行原位接种。接种量需根据小鼠的大小和预期的肿瘤负荷来决定。

  4.模型监控：接种后，定期监测小鼠的体重和健康状况，使用影像学方法（如超声心动图）跟踪肿瘤的生长。

  5.实验终点：根据研究目的设定实验终点，可能是肿瘤体积达到一定大小、小鼠出现明显症状或实验预定时间到达。

  6.样本收集：在实验终点处死小鼠，收集肿瘤组织和相关器官样本，进行后续的组织学和分子生物学分析。

例如：

实验动物: 裸鼠，雌雄各半，4-6周，18-20g

造模方法: 将Huh-7细胞消化后，收集到一起。无血清的培养基洗涤一次后进行细胞计数。将计数好的细胞用无血清的培养基重悬调整细胞密度待用。采用裸鼠进行腹腔麻醉，取仰卧位固定在手术板上，常规皮肤消毒，在裸鼠左肋下作一横行切口，然后逐层剪开皮肤暴露肝左叶。用细胞悬液,30°角刺入肝脏左叶，缓慢的注入细胞悬液，注射完毕后用无菌纱布轻压针孔至肝脏表面不再出血，逐层缝合关腹，待小鼠清醒后放回原饲养环境。

浙江大学赵斌及梁廷波团队通过体内原位基因编辑技术建立了25种具有特定基因型的原发性小鼠肝癌模型，并通过多组学联合分析阐明了这些

模型的异质性特征。这些模型能够更好地模拟人类肝癌的多样性和复杂性，适用于机制研究和临床前测试。

在建模过程中，应严格遵守动物福利和伦理规定，确保实验设计的合理性和必要性。在进行实验前，应获得相应伦理委员会的批准。

参考

[1]尹君, 李景丁莎, 左从林, 等. 人源性肝癌细胞小鼠原位移植瘤模型的建立及特点的比较研究[J]. 中国比较医学杂志, 2018,28(12):68-74.

[2]Tang M, Zhao Y, Zhao J, et al. Liver cancer heterogeneity modeled by in situ genome editing of hepatocytes[J]. Sci Adv, 2022,8(25):eabn5683.