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進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌流是獲得良好的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對(duì)于未經(jīng)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)人員,初次進(jìn)行灌流可能會(huì)失敗,故建議首先用一些對(duì)照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物練習(xí),以熟悉此過(guò)程。基本方案實(shí)驗(yàn)材料小鼠試劑、試劑盒PBS儀器、耗材23-G針頭注射管解剖器械實(shí)驗(yàn)步驟1.一支針管吸滿1×PBS,另一支吸4%PFA固定液(4℃),擱置待用。2.在袋中用CO2氣體處死小鼠。停止吸呼后,立刻背朝下放平小鼠,小心剖開胸腔防止過(guò)多出血,小心并迅速切開肋骨,剪去橫隔膜,暴露心臟。3.小心將吸...
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名稱:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血關(guān)鍵詞:動(dòng)物,取血,方法目的:規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(家兔、狗,豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容:(一)家兔1.耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈,拔去被毛,用二甲苯或酒精涂擦局部,小血管夾夾緊耳根部,使血管充血擴(kuò)張。術(shù)者持粗針頭從耳尖部血管,逆回流方向刺入靜脈內(nèi)取血,或用刀片切開靜脈,血液自動(dòng)流出,取血后棉球壓迫止血,取血量2~3ml。壓住側(cè)支靜脈,血液更容易流出;取血前耳緣部涂擦液體石蠟,可防止血液凝固。2.耳中央動(dòng)脈取血法家兔固定箱內(nèi),用手揉擦耳部,使中央動(dòng)脈擴(kuò)張。左...
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實(shí)驗(yàn)方法原理藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)動(dòng)物死亡率為50%時(shí)的單次給藥劑量,單位通常為mg/kg。例如,當(dāng)某藥物給予400mg劑量時(shí),可致使一半家兔(體重約為4kg)死亡,則其LD50值為100mg/kg。LD50值通常反映藥物急性毒性的大小。藥物的急性毒性、慢性毒性實(shí)驗(yàn)同屬于一般毒理學(xué)的研究范疇。此外,藥物毒理學(xué)研究尚包括特殊毒理學(xué)(致癌、致畸、致突變)、藥物依賴性及過(guò)敏反應(yīng)實(shí)驗(yàn)等。各種屬動(dòng)物均可用于藥物L(fēng)D50值的測(cè)定,通常使用嚙齒類動(dòng)物(大鼠和小鼠)...
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【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.學(xué)習(xí)大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2.觀察藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍的防治作用。3.了解組織切片和HE染色方法?!緦?shí)驗(yàn)原理】消化性潰瘍(pepticulcer)是由多種因素引起的一種常見病。正常情況下,機(jī)體有胃黏液、胃黏膜屏障(mucosalbarrier)、黏膜細(xì)胞更新以及胃、十二指腸節(jié)律性運(yùn)動(dòng)功能等一系列保護(hù)性機(jī)理,使胃、腸黏膜不受損傷。但過(guò)度的精神緊張、情緒激動(dòng),會(huì)使神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌功能紊亂;飲食失調(diào),如粗糙食物,骨刺等對(duì)黏膜的物理性損害...
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實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚蘭儀器、耗材離心管離心機(jī)風(fēng)光光度計(jì)電泳槽凝膠板RealtimePCR儀一、樣品RNA的抽提1.取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。2.兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃...
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ELISA實(shí)驗(yàn)因靈敏度高,特異性強(qiáng)在生物科研上得到了廣泛的認(rèn)可,但對(duì)初學(xué)者而言,如不注意實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié),可能會(huì)對(duì)最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響,比如實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無(wú)梯度背景高等現(xiàn)象。下面對(duì)以上實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行一一解析。1.白板現(xiàn)象在完成所有實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中所有孔的顏色均為無(wú)色,即無(wú)信號(hào)呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:試劑已過(guò)保質(zhì)期,不同批次稀釋液交叉使用。錯(cuò)加漏加檢測(cè)A,檢測(cè)B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過(guò)程中,酶標(biāo)記物被污...
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吉姆薩染液由天青,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。但本法對(duì)細(xì)胞核和寄生蟲著色較好,結(jié)構(gòu)顯示更清晰,而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差。基本方案實(shí)驗(yàn)材料原位雜交玻片試劑、試劑盒吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯儀器、耗材染色盤培養(yǎng)箱濾紙實(shí)驗(yàn)步驟1.將顯影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盤中。(1)1個(gè)盤:pH6.810mmol/l磷酸鈉緩沖液,所配的25倍稀釋的吉姆薩染液。(2)3個(gè)盤:水。(3)脫水系列溶液:①3個(gè)盤:分別盛50%、70%和95%乙醇。②2個(gè)盤:盛有...
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