18017847121
详细介绍
简介
MTT实验，全称为3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法，是一种常用于检测细胞存活和生长的体外实验方法。该方法基于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源性MTT还原成不溶于水的蓝紫色结晶甲臜（Formazan），而死细胞缺乏这种功能。通过测定溶液中甲臜的光吸收值，可以间接反映活细胞的数量。MTT实验因其灵敏度高、经济实用而被广泛应用于生物活性因子的活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等领域。
实验步骤
1.细胞培养：将对数生长期的细胞接种到96孔板中，并在适宜的条件下培养至细胞单层铺满孔底。
2.药物处理：向含有细胞的孔中加入不同浓度的测试药物，并继续培养一段时间。
3.MTT添加：向每个孔中加入MTT溶液，继续培养以允许活细胞将MTT还原。
4.终止培养：停止培养后，去除孔内的培养液，并用二甲基亚砜（DMSO）溶解甲臜结晶。
5.比色测定：在酶联免疫检测仪上测定各孔的吸光度值，通常在490nm或570nm波长处进行测量。
6.数据分析：根据吸光度值计算细胞的相对生存分数或抑制率，并进一步分析药物的效力。
注意事项
1.MTT溶液应现配现用，并在避光条件下保存。
2.实验过程中应避免交叉污染，并注意使用无菌技术。
3.在离心和吸液步骤中，应轻柔操作以?；は赴?。
4.溶解结晶物时，应充分振荡以确保wanquan溶解。
5.实验结果的线性范围通常建议在OD值0-0.7之间。
6.MTT法只能用来检测细胞的相对数和相对活力，不能直接测定细胞的绝对数。
产品咨询
欢迎来到
联系人：张
地址：上海市长江南路180号长江软件园B区B637室
邮箱：2844970554@qq.com
传真：