Transwell小室跨膜电阻实验

Transwell小室跨膜电阻实验简介

Transwell小室跨膜电阻（Transepithelial Electrical Resistance, TEER）实验是一种常用于评估细胞膜完整性和细胞层渗透性的技术。TEER值能够反映细胞膜的电阻，从而间接衡量细胞层的紧密连接程度。在体外细胞模型中，如血脑屏障（BBB）模型，TEER值是评价模型功能的重要参数。

Transwell小室跨膜电阻实验步骤和关键要点

  1.细胞培养：选择合适的细胞系进行培养，以构建具有特定功能的细胞层，如内皮细胞或上皮细胞。

  2.Transwell小室准备：使用含有透膜的Transwell小室，透膜通常由聚碳酸酯（PC）或聚四氟乙烯（PTFE）制成，孔径大小根据实验需求选择。

  3.细胞接种：将细胞接种到Transwell小室的上室内，使其附着并生长形成单层细胞。

  4.培养条件优化：确保提供适宜的培养条件，包括温度、CO2浓度和培养基，以促进细胞的正确分化和紧密连接的形成。

  5.TEER值测量：使用专门的TEER测量仪器，如EndOhm Chamber，来测量细胞层的电阻值。在测量前，确保Transwell小室和电极清洁，避免污染和损坏。

  6.数据记录和解析：记录TEER值，并根据实验设计进行适当的数据处理和解析。TEER值通常以Ω·cm2表示，较高的TEER值表明细胞层的屏障功能较强。

实验技巧和常见问题解决方案

  1.细胞状态和成熟度：确保细胞达到适当的分化状态和成熟度，这可能需要进行更长时间的培养或使用特定的培养条件和培养基。

  2.细胞-基质相互作用：优化细胞与透膜的相互作用，可能需要预涂层透膜，如使用胶原蛋白或胶原蛋白类似物等。

  3.培养条件和培养基：提供细胞所需的适当培养条件和培养基，以支持细胞生长和屏障功能的形成。

  4.培养时间：继续培养细胞并定期测量TEER，观察其动态变化，以获得最佳的实验结果。

  5.质量控制：确保实验中使用的Transwell小室和测量设备的质量良好，并按照操作说明正确操作。

时效性信息

根据最新的搜索结果，有关Transwell实验的讨论和操作分享仍然是科研人员关注的话题。例如，有研究者分享了使用bEnd.3细胞构建体外BBB模型时的TEER值范围，以及可能影响电阻值的因素和解决方案。此外，还有关于Transwell实验操作的详细步骤和技巧的分享，这些信息对于设计和执行TEER实验非常有帮助。在进行实验时，应参考这些最新的实验操作和讨论，以确保实验的准确性和可靠性。